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    如何檢測激酶細胞株的增殖和生長狀態?
    點擊次數:77 發布時間:2023-06-09
       激酶是一類蛋白質,在細胞內發揮著調控細胞信號傳遞、細胞分化、細胞周期、凋亡等生命活動的重要作用。因此,對于細胞內激酶的研究,常常需要檢測激酶細胞株的增殖和生長狀態,以了解其生物學行為并進行相關研究。以下是幾種常用的檢測激酶細胞株增殖和生長狀態的方法:
     
      1.MTT法
     
      MTT法是通過將Methylthiazolyltetrazolium(MTT)顯色劑加入細胞培養基中,使其與細胞內還原酶反應而轉化為紫色的甲酚藍鹽。該方法的優點是操作簡單,資料穩定性好。MTT顯色可以實時、非侵入性地監測細胞增殖和毒性。該方法的缺點是相對于數玻璃計數方法會低估細胞密度。
     
      2.數玻璃計數法
     
      數玻璃計數法是通過用數玻璃顯微鏡計數室計數實際生長的細胞,然后根據初始種植密度(細胞數/mL)和所需培養時間來計算增殖率或細胞倍增時間。該方法的優點是真實可信,準確度高。缺點是一定程度上是一個侵入性方法,不適用于多次觀察相同細胞系。
     
      3.端粒酶鏈反應
     
      端粒酶鏈反應(telomeraseactivityassay)可以通過核酸酶P1限制酶切和聚合酶鏈反應(PCR)擴增來檢測細胞中的端粒酶酶活性。該方法可用于監測細胞增殖和生長狀態,因為正常細胞的端粒長度與其增殖能力相關,而癌細胞中的端粒長度呈現出一定程度的縮短。但是,端粒酶鏈反應的操作復雜且成本較高,不如MTT法和數玻璃計數法便捷。
     
      4.流式細胞術
     
      流式細胞術可以檢測激酶細胞株或其他細胞株中的生存率、增殖率、細胞周期。在流式細胞術中,可以使用多種細胞染色劑和細胞標記物,如熒光素或熒光染料,以便于辨識細胞,并測定其標記物的濃度。通過對細胞的外形、大小、熒光密度以及標記物的種類和數量等特征進行多維度測算,提高細胞分析的準確性和精度。
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