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    如何檢測示蹤細胞株的純度和穩定性?
    點擊次數:85 發布時間:2023-06-12
       為了進行細胞功能及代謝研究,通常需要使細胞株具有一定穩定性并確保純度,而示蹤細胞株也不例外。此外,選擇合適的方法對于細胞穩定性和純度的檢測和分析也十分重要。下面介紹幾種常用的檢測示蹤細胞株純度和穩定性的方法。
     
      1.黏度法
     
      黏度法是一種基于細胞的粘度或濃度來確定細胞數量的方法。該方法適用于細胞濃度較高的情況,并可以檢測細胞株的純度。黏度法的操作簡單,但有些細胞的形態和大小不同,會導致粘度與實際細胞濃度不同。同時,黏度法檢測示蹤細胞株的純度時,需要將細胞株單獨培養,避免與其他細胞干擾產生誤差。
     
      2.多聚化酶鏈反應
     
      多聚化酶鏈反應(multiplexPCR)可并行擴增多個DNA片段,包括細胞株核酸和不同的污染源的DNA。通過使用特定的引物組合,僅擴增目標細胞株而非污染源的DNA,在PCR后進行分析,可以了解細胞株的純度。此外,該方法同樣適用于檢測細胞株的穩定性,并可獲得對多個下游應用有價值的分子生物學數據。
     
      3.流式細胞術
     
      流式細胞術可以同時對單個細胞進行快速、精準的檢測和分析。其操作流程簡單,且可多角度測定單個細胞的熒光強度、形態、大小等生物學特征,從而快速鑒定細胞的純度和穩定性。不過,流式細胞術比較復雜,需要精確的流式細胞術儀和標記熒光素染料等。
     
      4.Westernblotting
     
      Westernblotting技術可檢測細胞株中特定蛋白的表達情況,從而評估細胞純度和穩定性。通過抗體結合和電泳分離等技術,Westernblotting可以非常敏感地檢測植入的蛋白并確定其數量。此外,由于多數標記物在細胞內表達周期固定,可以通過Westernblotting來明確細胞株的生長狀態和穩定性。
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